originpro8怎么绘制高效液相色谱仪(origin做液相图)
8852023-07-28
style="text-indent:2em;">大家好,今天小编来为大家解答液相色谱峰怎么弄好看这个问题,高效液相色谱仪标准曲线怎么做很多人还不知道,现在让我们一起来看看吧!
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在色谱中,峰面积和浓度是成正比的。标准曲线就是一条横轴是浓度,纵轴是峰面积的曲线。
做标准曲线首先你的有标准物质,然后有一个曲线的浓度范围。
比如说,标准物质X,浓度是.1mg/ml-2mg/ml。
配制样品的时候,取X适量,配制成浓度为1mg/ml的母液,然后逐级稀释,配制成浓度为.1mg/ml,.2mg/ml,.5mg/ml,1.mg/ml,2.mg/ml的样品,然后按照浓度由低到高的顺序进样分析。(由低到高是避免系统误差)
注意:这里是配制一份样品,稀释成若干线性用的样品。一般至少5个浓度。
比如结果是:
浓度峰面积
.11
.22
.549
1.95
2.195
然后可以再excel上形成散点图。然后添加趋势线,并且显示R2和公式。这个y=97.4x+.498就是这个线性公式,R2是相关系数。我故意做的偏了一点。这个系数越接近1,你的线性做得就越准。
可以,根据你的分析目的来设定,比如有时候我们用归一化法,客户允许我们忽略0.3%以下的杂质,那么我们可以把最小峰面积设到主峰的0.3%
如果是用外标法定量,那么只要注意标准曲线的积分参数跟样品的积分参数一致就可以了
影响峰纯度的因素较多,而选择最直观和有效的方法主要取决于具体情况。但常见的方法包括:使用高效液相色谱(HPLC)进行样品的分离,调整流速和柱温、优化色谱柱的选择和样品预处理等。其中最直观的方法是通过调整流速和柱温等实际操作环节,结合前期的实验经验反复试验,不断优化最终得到理想的峰纯度。
色谱峰峰形可以看出物质的极性(如果色谱柱的柱效还达到要求的话),半峰宽越小柱效越好,柱效好的半峰宽也会窄。
这是有条件的,因为峰宽和流动相的流速(载气的流速)有关,还有不同的流动相(液相)也会影响峰宽。
当然,在其它条件都相同的情况下,半峰宽越小的柱效越高;柱效越高的的半峰宽也越小,这两句都是对的。比如超高效的液相色谱的峰几乎是一条竖线。当然,一般的情况下,柱效影响的主要还是分离度,而不是峰宽的问题。
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